抗体(英语:antibody),(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面[1]

结构

抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链);2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种,重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中,不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于\"Y\"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈,这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面,最多由17个氨基酸残基构成,少则只有2 ~ 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。\"Y\"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC),糖结合在FC 上。

右图是抗体的结构示意图:下图是其立体模型:

鉴定

荧光抗体在使用前应加以鉴定。鉴定指医学标记包括效价及荧光素与蛋白质的结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A2801≈1.0,分别测读A280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。

F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越多,反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色的以F/P=2.4为宜。

抗体工作浓度的确定方法类似ELISA间接法中酶标抗体的滴定。将荧光抗体自1:4~1:256倍比稀释,对切片标本作荧光抗体染色。以能清晰显示特异荧光、且非特异染色弱的最高稀释度为荧光抗体工作浓度。

荧光抗体的保存应注意防止抗体失活和防止荧光猝灭。最好小量分装,-20℃冻存,这样就可放置3~4年。在4℃中一般也可存放1~2年。

功能

抗体的主要功能是与抗原(包括外来的和自身的)相结合,从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物,抗体(antibody)是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。每种抗体与特定的抗原决定基结合。这种结合可以使抗原失活,也可能无效但有时也会对机体造成病理性损害,如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生,对人体可造成危害

规律

(1)初次反应产生抗体:当抗原第一次进入机体时,需经一定的潜伏期才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。

(2)再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后,抗体效价迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。

(3)回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为特异性回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。

特色试剂盒,如:类花生酸类物质、游离的生物标志、环核苷、激素及氧化氮等。另外,Cayman提供多种高质量试剂,包括:类花生酸类物质、氧化氮试剂及许多相关脂质、脂肪酸、酶和抗体。

德国美天旎公司是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。主要开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术,尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势。CD133、BDCA-2(CD303)、BDCA-4(CD304)单抗均为其专利产品。

Assay Designs

位于美国的密歇根州,成立于1992年,为全世界生化、医药专业的科研工作者提供优质、快速、方便的产品,\"使您的科研更为简单\"。公司可提供检测和定量细胞调节、信号转导、炎症、氧化过程和凋亡相关的分子。公司开发了CORRELATE 和TITERZYME 免疫试剂盒,活性检测试剂盒、FLASHLIGHT and BIOLIGHT 发光混合物、抗体等。Assay Designs 提供各种eicosanoid试剂盒、人和小鼠的细胞因子试剂盒以及世界唯一的非放射性COX活性检测试剂盒,其精确和重复性无与伦比。另外,公司大量提供抗原和抗体相关产品。

Dynal Biotech ASA

成立于1986年,是一家在德国、法国、英国、美国、中国及澳大利亚均设有分公司的跨国公司,总部位于挪威奥斯陆。总公司一直致力于磁性分离技术和HLA相关产品的研究、生产和销售。经过多年发展,其产品线已覆盖了免疫学、分子生物学、微生物学、HLA等生命科学领域。1996年,Dynal Biotech ASA 通过了ISO9001质量体系认证;2002年,两个系列产品取得CE认证;2003年,再次通过ISO9001:2000以及ISO13485质量体系认证。2004年3月,其产品通过了美国FDA认证。

2005年2月,Invitrogen公司成功收购Dynal Biotech公司。

DSL公司

位于美国的得克萨斯州,成立于1981年,致力于诊断产品的研发和生产,是世界上激素检测领域的领先者。DSL公司本着顾客至上的原则,能更迅速的适应变化,提供给客户最好的产品和服务。

公司平均每年推出20-30种新产品,可以提供给客户最新的产品和服务:

·免疫诊断分析和内分泌检测试剂

·传染病诊断

·研究用试剂

·CLIA认证的实验室

·抗体开发,蛋白质纯化的研发

罗氏公司(Roche)

应用科学部致力于生命科学领域产品的开发,向用户提供优质的科研产品。在1998年收购德国宝灵曼(Boehringer Mannheim)公司后,产品涵盖了分子生物学,细胞学,免疫学,蛋白质组学,生物化学等多个研究领域,罗氏拥有PCR以及地高辛标记产品的全球专利,其DIG标记产品和细胞凋亡相关产品在业内享有极高的声誉。五十年来,罗氏应用科学部专注于生命科研领域产品的开发和推广,如今已经有超过2000种的科研产品在市场上销售,覆盖了生命科学研究领域的各个方面,为科研工作者提供完整的解决方案。

BioLegend公司

位于美国加州,致力于为生物医药研究的各个前沿领域提供高质量的抗体及其它相关试剂。BioLegend聚集了一批来自PharMingen公司的专业人士,建立了一支具有雄厚技术背景的专业队伍,其中该公司的CEO更是为PharMingen公司的创始人之一。通过其自身的先天优势,以及与世界知名实验室和研究所的良好合作关系,其目标是以最合理的价格为广大客户提供高质量的免疫学和细胞生物学产品。BioLegend公司以其专业技术力量为保证,提供各种质量卓越的产品,并不断地开发新产品,以满足飞速发展的生命科学研究的需要。

eBioscience公司

来自美国圣地亚哥,以其高品质的产品,良好的服务及实惠的价格赢得了多家世界顶尖实验室和科研机构的青睐。该公司一直致力于炎症方面的单克隆抗体的研究,在TLR方面有着很高的长久。

SBA(Southern Biotechnology Associates, Inc.)

公司建于1982年,由美国伯明翰的阿拉巴马大学(UAB)的Dr. Max Cooper细胞免疫学实验室的科学家创建。SBA致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)和F(ab\')2,此外还有纯化的免疫球蛋白和胶原质。

NeoMarkers (Lab Vision & NEOMARKERS) 公司

在免疫组织化学产品领域上处于世界领先水平。Lab Vision & NEOMARKERS从研究与临床需要出发,设计开发产品,真正满足实际要求,产品已被生命科学研究群体所广泛认同;有完善的专业文献资料积累,所有产品都提供详细的技术资料与重要的相关文献;产品提供多种规格,单抗有0.1ml和1.0ml与即用型(7ml)以及纯化的抗体(试用型20ug,100ug与200ug),可以适应各种不同要求,此外还可根据实验要求选择特定的产品形式或规格。

BioVision. Inc

位于美国加州的Palo Alto,是世界上首屈一指专著于凋亡和细胞信号研究的公司。其产品质优、价廉、包装使用方便。BioVision致力于为研究者们提供最好、最新的研究工具而不断扩大产品及服务质量。该公司提供用于检测早、中、晚期凋亡的试剂,可以检测凋亡发生的不同区域,包括:线粒体、胞浆、胞膜及胞核。

KPL公司是美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上最大的二抗和底物显色系统的生产商。其可以提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂,其产品有:亲和纯化的抗体和偶联物、ELISA和杂交底物、蛋白检测和纯化试剂盒、核酸标记和检测试剂以及其它辅助试剂等。

MABTech

是瑞典的一家生物公司,成立于1986年;他们生产高质量的单克隆抗体,一直致力于ELISpot配套抗体的研究,其ELISpot技术处于世界领先水平.

MABTech公司生产的ELISPOT细胞因子检测试剂盒涉及多个种属:

Human: IFN-gamma、CEF Peptide pool、Inteferon-alpha、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12(tot IL-12)、IL-12(IL-12 p70)、IL-13、GM-CSF、TNF-alpha、Perforin、Granzyme B

M: IFN-gamma、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-12(tot IL-12)、IL-13、GM-CSF

Mouse: IFN-gamma、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12(tot IL-12)、IL-12(IL-12 p70)

Bovine: IFN-gamma

MABTech公司提供四种类型的ELISPot试剂盒和相关配套试剂:

1、 ELISpot PRO kit:包括包被有捕获抗体的PVDF板、ALP标记的检测抗体、BCIP/NBT底物。

2、 ELISpot PLUS kit:包括PVDF板(白色)、捕获抗体、生物素化检测抗体、ALP标记链亲和素、BCIP/NBT底物。

3、 ELISpot kit:包括包被抗体、生物素化检测抗体、酶(ALP或HRP)标链亲和素。

4、 抗各种细胞因子的抗体